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新品首發(fā) | ATCC助力心血管疾病研究——人永生化肺動(dòng)脈內皮細胞
背景資料
根據世界衛生組織部公布的全球十大致死病因中,心血管疾病常年居于首位。因此,降低心血管疾病的產(chǎn)生及風(fēng)險干預是當前醫學(xué)研究的重要課題之一。
而在心血管中的內皮細胞具有充當血液和周?chē)M織之間的屏障、調節血管功能、控制血管舒張和收縮、抑制白細胞和血小板粘附防止血液凝固、釋放血管活性物質(zhì)等重要血管生物學(xué)功能。
利用內皮細胞開(kāi)發(fā)診斷工具,進(jìn)行早期檢測內皮穩態(tài)紊亂或干預措施,在心血管疾病的治療方面是一個(gè)重要的發(fā)展方向。
原代細胞是是指從機體取出后立即培養的細胞。通常把離體培養第1代至10代以?xún)鹊募毎Q(chēng)為原代細胞,正常組織來(lái)源的原代細胞通??梢栽隗w外培養條件下生長(cháng)和分裂,但經(jīng)過(guò)有限次的細胞傳代后,就會(huì )停止增殖并死亡,限制了細胞培養技術(shù)的進(jìn)一步應用。
利用細胞永生化技術(shù),可以通過(guò)基因變化或者外界各種刺激因素,使細胞在體外培養的過(guò)程中,避免正常細胞的衰老死亡過(guò)程,從而實(shí)現長(cháng)期傳代培養、無(wú)限分裂增殖,進(jìn)而提升原代細胞的利用次數和實(shí)用價(jià)值。
B 淋巴瘤莫洛尼鼠白細胞病毒(Mo-MLV)插入位點(diǎn)1(BMI-1)是一個(gè)轉錄抑制因子,在1991年被首次報道,隸屬于PcG蛋白家族,在細胞增殖和多種腫瘤干細胞自我更新、分化調節中發(fā)揮重要作用。
在多項研究中發(fā)現,BMI-1與人類(lèi)多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),例如乳腺癌、胃癌、宮頸癌、膀胱癌、大腸癌等。
BMI-1通常在癌癥中具有高表達的特性,而在正常組織細胞或良性病變組織中呈現低表達或不表達的特點(diǎn),并且與患者預后不良呈一定的相關(guān)性,這一特性使得BMI-1成為癌癥預后評測指標的數據參考,并且具有患者疾病早期診斷的臨床醫學(xué)意義。
ATCC特推出人永生化肺動(dòng)脈內皮細胞。
新產(chǎn)品的誕生
人永生化肺動(dòng)脈內皮細胞(HPAEC-BMI1)是利用 B 淋巴瘤莫洛尼鼠白細胞病毒(Mo-MLV)插入位點(diǎn)1(BMI-1)永生化的原代人類(lèi)肺內皮細胞。
該細胞系可用于研究心血管疾病、肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病機制,或發(fā)現和開(kāi)發(fā)抗血管生成或促進(jìn)血管生成的化合物。
產(chǎn)品信息
ATCC貨號 |
CRL-4065 |
生物體 |
人體 |
組織/疾病 來(lái)源 |
肺動(dòng)脈,正常 |
產(chǎn)品描述 |
HPAEC-BMI1是通過(guò)在原代肺動(dòng)脈內皮細胞中穩定表達人BMI1基因而永生化的克隆細胞系。這些細胞保留了重要的內皮細胞特征和功能,如表達CD31/PECAM-1,攝取乙?;兔芏戎鞍祝ˋcLDL),并在基底膜基質(zhì)上形成毛細血管樣管。 |
產(chǎn)品應用 |
可用于心血管疾病研究、血管生成研究、藥物篩選和毒理學(xué)測試。 |
實(shí)驗數據
圖1:HPAEC-BMI1的細胞形態(tài)。細胞在A(yíng)TCC推薦的培養條件下培養。在顯微鏡下觀(guān)察低(左)和高(右)密度的細胞形態(tài),并用數碼相機拍攝圖像。倍增時(shí)間:約30小時(shí)
CD31表達
圖2:HPAEC-BMI1細胞中CD31表達的流式細胞術(shù)分析。收獲細胞并用PE小鼠抗人CD31抗體(紅色直方圖)或PE小鼠IgG1,κ同種型對照抗體(藍色直方圖)染色。在Beckman Coulter CytoFlex細胞儀上進(jìn)行流式細胞術(shù)。
乙?;兔芏戎鞍祝ˋcLDL)的提取實(shí)驗
圖3:HPAEC-BMI1細胞對AcLDL的攝取。細胞在四孔室載玻片上培養,并與Alexa Fluor 488 AcLDL一起孵育4小時(shí)。之后,用培養基洗滌細胞,然后在培養基中,在GFP熒光和透射光下使用EVOS熒光顯微鏡觀(guān)察和拍照。不含Alexa Fluor 488 AcLDL的培養基中的細胞用作空白對照
舒尼替尼對毛細血管樣管形成的影響
圖4:舒尼替尼抑制HPAEC-BMI1細胞毛細血管樣管的形成。血管形成測定在24孔板中進(jìn)行。將在含有0、0.5、1.0、2.0和5.0 μM舒尼替尼(Sigma,#PZ0012)的培養基中的細胞接種到基底膜基質(zhì)上(細胞基底膜;ATCC ACS-3035™)。在37°C下孵育24小時(shí)后,使用EVOS熒光顯微鏡在透射光下觀(guān)察并拍攝毛細管狀管。
舒尼替尼對細胞遷移的影響
圖5:舒尼替尼抑制HPAEC-BMI1細胞的遷移。細胞在12孔板中生長(cháng)至完全融合,然后用無(wú)菌的1200μL移液管尖端將細胞層劃傷。將含有0、0.5、1.0、2.0和5.0 μM舒尼替尼的培養基加入孔中。在透射光下使用EVOS熒光顯微鏡在0、17和24小時(shí)觀(guān)察和拍攝孔間隙。
結合永生化技術(shù)及BMI-1蛋白特點(diǎn),這些永生化細胞是人類(lèi)內皮微血管細胞不斷再生的來(lái)源,可以作為原代人肺內皮細胞的替代物用于許多研究。
該細胞產(chǎn)品具體可用于研究心血管疾病、肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病機制,或發(fā)現和開(kāi)發(fā)抗血管生成或促進(jìn)血管生成的化合物,可進(jìn)一步助力您的科學(xué)研究順利進(jìn)行!
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參考文獻:
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