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IgGZERO（EndoS）和GlycINATOR（EndoS2）都是內切糖苷酶，均可快速水解IgG 的Fc 結構域上的N- 聚糖。

但是你知道嗎？哪種內切糖苷酶可以去除人IgG上的所有高甘露糖型聚糖？哪種內切糖苷酶對雜合型聚糖更有效呢？

別著(zhù)急，咱們接著(zhù)往下看～

GlycINATOR（EndoS2）

GlycINATOR（EndoS2）是一種內切糖苷酶，可以迅速水解IgG中的Fc結構域的N-聚糖結構。

GlycINATOR在第一個(gè)乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）后切除N-聚糖。GlycINATOR可以有效地從IgG中去除高甘露糖型，以及復合型和雜合型的Fc 聚糖。該反應可在生理條件下快速、溫和地進(jìn)行。該酶作用于天然IgG，并且不需要去垢劑。

GlycINATOR通過(guò)減少由補體結合或交叉反應性引起的各種免疫測定中的副作用而成為一種有效的工具。

劃重點(diǎn)

      · 對高甘露糖型和平分糖型有效

      · 快速去糖基化，操作時(shí)間僅30分鐘

凍干粉——

GlycINATOR水解Fc的N-聚糖，包括高甘露糖型和平分型聚糖。該酶成品為凍干制劑，可以用于2 mg IgG的去糖基化反應。

固定化的GlycINATOR離心柱，GlycINATOR酶通過(guò)共價(jià)結合在瓊脂糖小球上。這種固定化的GlycINATOR可以對Fc的N-聚糖去糖基化，而最終產(chǎn)品中不會(huì )含有這種酶。

IgGZERO（EndoS）

IgGZERO（EndoS）是對天然IgG 具有獨特特異性的內切糖苷酶。它對于Fc 結構域上的N- 聚糖具有特異性，在第一個(gè)乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）之后切除N- 聚糖。

該酶僅水解IgG上的N-聚糖，即使在其他糖基化蛋白質(zhì)存在的情況下。該反應在生理條件下快速和溫和地進(jìn)行，不需要去垢劑。

該酶通過(guò)減少由補體結合或交叉反應性引起的各種免疫測定中的副作用而成為一種有效的工具。

劃重點(diǎn)

     · 特異作用于Fc聚糖

     · 快速去糖基化，操作時(shí)間僅30分鐘

     · 血清中也有活性

凍干粉——

IgGZERO 特異性水解IgG F c結構域上的N-聚糖。該酶以?xún)龈煞鄣男问焦?/p>

deGlycIT是固定在瓊脂糖上的IgGZERO，可以快速和選擇性去除Fc上的N-聚糖。提供的離心柱預先填充有固定化IgGZERO，可用于少量甚至高達數百mg抗體的去糖基化。

GlycINATOR（EndoS2）   VS    IgGZERO（EndoS）

IgGZERO(EndoS)GlycINATOR(EndoS2)快速水解IgG 的Fc 結構域上的N-聚糖。 

GlycINATOR 可以去除人IgG 上的所有高甘露糖型聚糖，但是IgGZERO不能。兩種酶均可除去復雜型聚糖，而GlycINATOR 對雜合型聚糖更有效。

西妥昔單抗（Cetuximab）的去糖基化

為了比較IgGZERO和GlycINATOR對N-聚糖的特異性，分別用這兩種酶對西妥昔單抗進(jìn)行去糖基化?？贵w去糖基化后，用FabRIC ATOR水解為F（ab ’）2和Fc片段。西妥昔單抗含有高甘露糖型聚糖。

反應30分鐘后，這些高甘露糖型聚糖可以被GlycINATOR切除，但IgGZERO卻不能。

用反相高效液相色譜（RP-HPLC）分析去糖基化

The removal of glycans on Fc is seen as a shift in retention time in reversed phase chromatography. Chromatogram A: Fc with intactN-glycans, Chromatogram B: IgG deglycosylated with GlycINATOR, Chromatogram C: IgG deglycosylated with IgGZERO.

看完這篇內容，相信大家對IgGZERO(EndoS)和GlycINATOR（EndoS2）有了更深刻的了解，實(shí)驗前可不要選錯了內切糖苷酶哦~