Bio-Techne 的 ELISA 試劑盒家族陣容強大，簡(jiǎn)直是神仙打架：既有享譽(yù)業(yè)界的金標準 Quantikine® 系列，又有性?xún)r(jià)比之王 Valukine® 系列，還有為 ELISA 高手量身打造的 DuoSet® 系列。

一、DIY 你的專(zhuān)屬 ELISA 試劑盒

說(shuō)起 DuoSet® 系列，其屬于開(kāi)發(fā)型 ELISA 試劑盒，適合動(dòng)手能力強、經(jīng)驗豐富的 ELISA「資深玩家」，特別適用于在各種不同平臺上進(jìn)行免疫學(xué)實(shí)驗開(kāi)發(fā)設計，為研究者提供極為經(jīng)濟、靈活、快捷的方案。DuoSet® ELISA 試劑盒的組分包括：捕獲抗體、生物素化檢測抗體、校正的蛋白標準品、鏈霉親和素偶聯(lián)的辣根過(guò)氧化物酶（Streptavidin-HRP）。

與包含 ELISA 實(shí)驗所有必需試劑的即用型 Quantikine® ELISA 試劑盒不同，DuoSet® ELISA 試劑盒驗證了細胞培養上清的樣本，如需檢測含有復雜基質(zhì)的樣本（如血清和血漿等），則需要進(jìn)一步優(yōu)化。

二、如何選擇 DuoSet 的黃金搭檔

那么要順利開(kāi)展完整的 ELISA 實(shí)驗，DuoSet® ELISA 試劑盒需要搭配哪些附屬試劑？我們的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)提供了詳細信息。

在說(shuō)明書(shū)的「Other Materials & Solutions Required」部分，會(huì )提示需要搭配哪些試劑，產(chǎn)品頁(yè)面也會(huì )給出建議搭配的附屬試劑（請參考下圖）。大部分 DuoSet® ELISA 試劑盒可以直接購買(mǎi)成套的輔助試劑盒，例如 DY007、DY008、DY009 等。

如果你有較長(cháng)時(shí)間的 ELISA 開(kāi)發(fā)經(jīng)驗，可自行配制一套合適的附屬試劑。如果你是初次接觸 DuoSet® ELISA 試劑盒，附屬試劑的配制又稍顯繁瑣，這時(shí)我們還是推薦使用 DY007、DY008 或 DY009 作為起步，因為這些附屬試劑盒均已經(jīng)過(guò)驗證，適用于 ELISA 實(shí)驗。

此外附屬試劑盒的組分也可單獨出售。例如：DY008 由以下試劑組成，每種試劑均可單獨購買(mǎi)：

• ELISA Plate-Coating Buffer，DY006；
• Stop Solution，DY994；
• Substrate Reagent Pack (8 vials Color A, 8 vials Color B)，DY999；
• Wash Buffer Concentrate，WA126；
• Clear Polystyrene Microplates，25 pack，DY990；
• ELISA Plate Sealer，100 Pack，DY992；
• Reagent Diluent Concentrate 2 (10X, 5x21 mL)，DY995。
   

為什么有必要提及附屬試劑？我們舉個(gè)來(lái)自用戶(hù)的例子，體現附屬試劑的重要性：

下表中顯示，用戶(hù)使用 cat# DY450：Mouse CCL3/MIP-1 alpha DuoSet ELISA 和自行組配的附屬試劑，得到的標準品 OD 值（450 nm 的測定值減去 570 nm 的測定值）?？梢钥吹?，全部標準品 OD 值（包括未加標準品 0 值孔）均出現高的顯色，無(wú)梯度。

經(jīng)過(guò)問(wèn)題排查，我們推測可能是附屬試劑牛血清白蛋白（BSA）造成的影響。實(shí)際上，幾乎所有的 BSA 制劑中都會(huì )發(fā)現不同程度的雜質(zhì)，例如蛋白酶、結合蛋白、可溶性受體或其他干擾物質(zhì)，會(huì )抑制或干擾某些分析物的檢測。

我們推薦使用 fraction V（第五組分），無(wú)蛋白酶的 BSA，例如 Reagent Diluent Concentrate 1 或 2（貨號 DY995，DY997）。后續用戶(hù)使用 DY008 附屬試劑盒替代之前的附屬試劑，重新實(shí)驗，結果恢復正常。

不僅是 BSA，任何一種附屬試劑出現問(wèn)題，都可能對 ELISA 結果造成極大的影響。所以，如果您希望盡快的開(kāi)展 DuoSet®  ELISA 實(shí)驗，推薦以 DY007、DY008、DY009 為起點(diǎn)開(kāi)始嘗試，一步步進(jìn)階大神。

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