在瀏覽 Bio-Techne 網(wǎng)站的重組蛋白產(chǎn)品時(shí)，大家常常會(huì )對品名中的「CF」產(chǎn)生疑惑。CF 代表什么含義？品名中含/不含 CF 的蛋白有什么區別？哪種產(chǎn)品更適用于我的實(shí)驗？本文一一來(lái)解惑。

1. CF 其名，其意 

CF，是 Carrier Free 的意思。一般來(lái)說(shuō)，為了對重組蛋白的結構及活性進(jìn)行保護，我們會(huì )在蛋白產(chǎn)品中添加牛血清白蛋白（BSA）作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會(huì )對某些實(shí)驗造成影響，我們又研發(fā)出不含載體蛋白（BSA）的產(chǎn)品，即 Carrier Free 蛋白。

注：并不是所有不標注 CF 的蛋白產(chǎn)品都含有 BSA，產(chǎn)品的具體成分需要參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)或 COA。

2. CF 蛋白與普通蛋白產(chǎn)品的區別

是否添加 BSA 是 CF 蛋白產(chǎn)品與普通蛋白產(chǎn)品最大的區別。這一區別使得凍干粉重溶溶液的選擇以及重組蛋白的用途有所差異。

在蛋白凍干粉重溶時(shí)，CF 蛋白產(chǎn)品只要使用說(shuō)明書(shū)推薦的溶液溶解到規定的濃度即可，而普通蛋白產(chǎn)品為了保證產(chǎn)品不會(huì )吸附到管壁上，為蛋白產(chǎn)品的重溶提供一個(gè)良好的環(huán)境，在溶液中還要額外添加 0.1% 的 BSA。

所需添加的 BSA 要求很高：不能含有蛋白酶，并且是 Fraction V 純度的 BSA。R&D Systems® 提供各類(lèi)含 BSA 的蛋白重溶溶液，如：RB02（BSA / PBS）和RB04（BSA/HCl），可以根據蛋白的重溶要求自行選擇。

在用途上，一般情況下，我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細胞或組織培養，或作為 ELISA 標準品。相對而言，當 BSA 可能會(huì )干擾實(shí)驗時(shí)，比如體內實(shí)驗、蛋白標記等，則推薦使用 CF 蛋白。另外，如果實(shí)驗平臺有特殊要求，也應根據要求選擇不含 BSA 的蛋白。

舉例產(chǎn)品：Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein, CF（貨號 7270-IL/CF）/ Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein（貨號 7270-IL）

3. CF 蛋白維持高活性的秘訣

對比 CF 蛋白和普通蛋白，無(wú)論蛋白是否添加 BSA，它們的生物學(xué)活性實(shí)驗結果、運輸條件、保存條件及效期都沒(méi)有區別。既然沒(méi)有 BSA 作為蛋白載體，是什么讓 CF 蛋白保持良好的穩定性和生物學(xué)活性呢？

舉例產(chǎn)品：Recombinant Human TNF-alpha (HEK293-expressed) Protein, CF

答案就在說(shuō)明書(shū) Formulation 那一欄里，我們在蛋白中添加了海藻糖。海藻糖是一種以?xún)蓚€(gè)葡萄糖分子通過(guò) α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖，不與氨基酸或蛋白質(zhì)發(fā)生反應。

它本身不存在于哺乳動(dòng)物體內，但哺乳動(dòng)物體內卻廣泛存在分解海藻糖的酶，且海藻糖作為一種小分子的半抗原，哺乳動(dòng)物對其免疫反應性很低。這使得海藻糖對活體實(shí)驗或異種移植等實(shí)驗的干擾極小。

海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態(tài)下改變其結構，更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學(xué)活性。目前，海藻糖以其高效的蛋白保護性能與相對低廉的價(jià)格漸漸代替 BSA，成為免疫實(shí)驗產(chǎn)品和蛋白類(lèi)產(chǎn)品添加劑的新寵。

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