很多小伙伴在收到抗體后，不知道該如何正確保存抗體產(chǎn)品？為什么有的產(chǎn)品要保存在-20°，有的卻要放在4°冰箱？不同類(lèi)型抗體儲存時(shí)候是否有差異？本篇將重點(diǎn)解答以上疑問(wèn)，請保存好這份abcam抗體保存指南，以便于以后查詢(xún)。

一、保存溫度

• 對于我們的許多抗體而言，分裝為小等份（推薦每份體積為 10 μL）在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下凍存是最佳的保存條件。分裝抗體可以最大限度減少凍融對抗體造成的損壞，還可避免多次從同一管中移取抗體而引入污染。分裝后抗體只可凍融一次，如有剩余，應保存在 4 ℃ 下。

• 收到抗體后，請以 10,000 × g 離心 20 秒，沉降滯留在管蓋螺紋中的溶液，然后分裝抗體并將其轉移至低蛋白質(zhì)結合的微量離心管中。分裝抗體的量取決于您在實(shí)驗中常用的量。分裝抗體應不少于 10 μL；分裝抗體量越少，濃度就越容易受到蒸發(fā)以及儲存樣品管表面吸附的影響。

• 在大部分情況下，可在收到抗體之后立即將其保存于 4 ℃ 下，可保存 1 至 2 周。具體產(chǎn)品還請遵循數據表上的保存建議，這一點(diǎn)非常重要！

二、特例

• 切勿凍存酶偶聯(lián)的抗體，而應將其保存在 4 ℃ 下。凍融不僅會(huì )影響抗體的結合能力，還會(huì )降低酶活性。

• 偶聯(lián)抗體（無(wú)論是偶聯(lián)有熒光染料、酶還是生物素）應保存在深色樣品瓶中或用錫箔紙包裹樣品瓶。暴露于光下會(huì )影響偶聯(lián)物的活性。熒光偶聯(lián)物尤其容易發(fā)生光致漂白，因此在實(shí)驗各階段都應避光保存。

• IgG3 同型抗體的獨特之處在于其解凍后容易形成聚集體，因此應始終保存在 4 ℃ 下。

• 腹水液中可能含有蛋白酶，因此收到后應盡快凍存。

三、污染

• 為了防止微生物污染，可將疊氮化鈉加入抗體制備物中，疊氮化鈉的最終濃度為 0.02% (w/v)。我們的多款抗體中都含有這種保護劑，其濃度范圍為 0.02%-0.05%。每個(gè)抗體產(chǎn)品數據表的保存緩沖液部分將對此進(jìn)行說(shuō)明。

四、不使用疊氮化鈉的情況

• 如果要用抗體對活細胞進(jìn)行染色或處理，或者要用抗體進(jìn)行體內研究，請務(wù)必使用不含疊氮化鈉的制備物。這種抗菌劑對大部分生物體都有毒害作用：它會(huì )阻斷細胞色素電子傳遞系統。

• 疊氮化鈉會(huì )干擾涉及胺基的所有偶聯(lián)反應，因此必須在進(jìn)行偶聯(lián)反應之前將其去除。完成偶聯(lián)反應之后，可使用疊氮化鈉保存抗體。另一種可用的抗菌劑是 0.01% 硫柳汞鈉（硫柳汞），這種物質(zhì)不含伯胺。

• 抗體溶液中的疊氮化鈉可通過(guò)滲析或凝膠過(guò)濾去除。IgG 的分子量為 150,000 Da（IgM 約為 600,000 Da），疊氮化鈉的分子量為 65 Da。截留分子量為 14,000 Da 的微滲析裝置可使疊氮化物順利擴散出去，而抗體得以保留。

• 滲析過(guò)程在燒杯中（置于磁力攪拌器上，溫度保持 4 ℃）進(jìn)行，每毫升抗體使用至少 1 升預冷的 PBS，攪拌滲析裝置 6 小時(shí)。更換 PBS 兩次，每次更換后均攪拌至少 6 小時(shí)。如有可能，所有材料都應滅菌，并且應在無(wú)菌條件下處理所得制備物。

五、凍融損壞

• 反復凍融可能使抗體變性，導致抗體形成聚集體，從而降低其結合能力。所以抗體產(chǎn)品務(wù)必要避免反復凍融。

• 對大部分抗體而言，在 -20 ℃ 下保存就已足夠；在 -80 ℃ 下保存并無(wú)明顯優(yōu)勢。應避免使用無(wú)霜冰箱，因為此類(lèi)冰箱的凍融循環(huán)（用于減少霜的形成）正是保存此類(lèi)抗體需要避免的。出于相同的原因，應將抗體樣品瓶放在冰箱中溫度波動(dòng)最小的區域，例如抵靠冰箱背板放置而不是置于冰箱門(mén)架上。

• 有些研究人員向抗體中加入冷凍保護劑甘油（最終濃度為 50%）以防止凍融損壞；甘油可將冷凝點(diǎn)降至 -20 ℃ 以下。雖然這種方法可用于多種抗體，但我們僅對少數幾種 Abcam 抗體在這種保存條件下的穩定性進(jìn)行了測試，我們僅擔保遵循數據表建議進(jìn)行保存的抗體的性能。我們不建議在 -80 ℃ 下保存含甘油的溶液，因為該溫度低于甘油的冷凝點(diǎn)。請注意，甘油可能會(huì )被細菌污染。如果加入了甘油或任何冷凍保護劑，應當小心操作，確保獲得無(wú)菌制備物。

•  

六、蛋白質(zhì)和穩定劑

• 將抗體稀釋至工作濃度后，在 4 ℃ 下保存不得超過(guò)一天。一般而言，以高濃度保存的蛋白質(zhì)更不易降解，理想濃度是 1 mg/mL 或更高。這就是將蛋白質(zhì)（如 BSA）作為穩定劑加入抗體溶液的基本原理。加入的蛋白質(zhì)還能盡可能減少抗體結合到容器壁上造成的損失。請勿向將要進(jìn)行偶聯(lián)的抗體中加入蛋白質(zhì)穩定劑，因為蛋白質(zhì)穩定劑會(huì )與抗體競爭，降低偶聯(lián)效率。

中源生物是Abcam公司授權的一級代理商

如有相關(guān)問(wèn)題請撥打免費服務(wù)電話(huà)咨詢(xún)

400-8100-881

如您對我們的服務(wù)有任何的意見(jiàn)和建議請發(fā)至如下郵箱

service@sinozhongyuan.com