常見(jiàn)問(wèn)題&FAQ

Addgene是如何制備穿刺菌的？

收到Addgene質(zhì)粒后，您應該怎么處理？

Addgene推薦的細菌保存方法？

下面這個(gè)視頻中就這些問(wèn)題做了詳細的說(shuō)明。如果感興趣，趕快點(diǎn)擊視頻學(xué)習吧！別忘記了把好東西分享哦！

穿刺菌的制備

Addgene質(zhì)粒以穿刺菌的形式運輸。Addgene的技術(shù)人員會(huì )在裝有甘油菌的小管上打上二維的條形碼，每個(gè)穿刺菌對應一個(gè)單獨條形碼，以保證質(zhì)粒被正確運輸。

Addgene技術(shù)人員用無(wú)菌牙簽取一些庫存細菌，然后接種形成穿刺菌。穿刺接種的細菌在溫箱中孵育過(guò)夜（每個(gè)質(zhì)粒的生長(cháng)溫度信息可以在A(yíng)ddgene官網(wǎng)上查詢(xún)），并在第二天上午檢查其是否生長(cháng)，技術(shù)員應該在制備的穿刺菌表面上能看到細菌。條形碼在包裝時(shí)要再次掃描以確?？茖W(xué)家收到正確的質(zhì)粒樣品。

質(zhì)粒培養方法

您收到穿刺菌后，應該在4攝氏度冰箱中存放您的質(zhì)粒樣品。并在兩周內，在含有相應抗生素（每個(gè)質(zhì)粒的抗生素信息可以在A(yíng)ddgene官網(wǎng)上查詢(xún)）的瓊脂平板上劃線(xiàn)培養出單菌落。然后從一個(gè)單菌落中挑取細菌，接種到液體培養基中，依據Addgene網(wǎng)站上質(zhì)粒的生長(cháng)條件進(jìn)行過(guò)夜培養。

保存細菌時(shí)，需要將300 ul細菌的液體培養物和300 ul 50%的甘油按照1:1比例混合制成甘油菌，儲存在-80攝氏度冰箱中。甘油菌通常是長(cháng)期存儲質(zhì)粒的一個(gè)好方法。此外，您可以使用細菌培養物提取質(zhì)粒以備以后使用或存放。

更多信息，可以訪(fǎng)問(wèn)Addgene網(wǎng)站上的相關(guān)內容。

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