提到Protein A和Protein G，相信大家并不陌生，由于它們和抗體的特異性親和作用，所以可用于純化抗體，免疫共沉淀實(shí)驗等，其應用非常廣泛，本期小編帶大家仔細的認識一下Protein A和G，兩者的區別以及如何從中選擇。

1. Protein  A

20世紀中期，Jensen發(fā)現有一種蛋白可以與人和兔血清抗體廣泛結合，該蛋白于1964年首次被稱(chēng)為Protein A。  Protein A是一種金黃色葡萄球菌細胞壁蛋白質(zhì)，分子量42KD，它能夠特異性地結合多種免疫球蛋白的Fc區段而與Fab區或輕鏈結合很弱。天然的Protein A有5個(gè)IgG結合結構域和未知功能的非Fc結合域，結構示意圖如下：

此結構的蛋白A大量結合IgG的同時(shí)，其非Fc結合域能結合部分雜蛋白，導致洗脫下來(lái)的IgG純度不夠，因此科學(xué)家利用基因工程的方法克隆Protein A的基因并進(jìn)行改造，得到重組型蛋白A，其非特異性結合明顯降低。重組的蛋白A經(jīng)過(guò)改造后有一個(gè)C端的半胱氨酸，可以單點(diǎn)偶聯(lián)到瓊脂糖上，降低空間位阻的同時(shí)提高IgG的結合能力。一步親和層析后樣品純度可超過(guò)90%。

2. Protein G

蛋白Ｇ來(lái)自于鏈球菌Ｇ族的細胞表面蛋白，是III型Fc受體，分子量為25KD，其通過(guò)類(lèi)似于蛋白A的非免疫機制而結合抗體的Fc段，蛋白G與蛋白A均可結合抗體的Fc段，不同的是，蛋白G還能結合Fab段，且蛋白G可以更廣泛的結合更多類(lèi)型的IgG分子，多克隆IgG分子，同時(shí)蛋白G與血清蛋白結合水平低，產(chǎn)物純度高，且配基脫落更低?？贵w基本結構和蛋白A/G的結合位點(diǎn)如下圖所示：

蛋白G可以純化不能與蛋白A結合的哺乳動(dòng)物抗體。重組型的蛋白G經(jīng)改造后已經(jīng)去除了白蛋白結合位點(diǎn)（血清白蛋白是抗體來(lái)源的主要污染物）及細胞表面結合位點(diǎn)，減少了非特異性結合。

3. Protein A 和Ｇ親和力對比

蛋白A和蛋白G對于不同種屬和不同亞型的抗體結合能力差異如下表所示，蛋白A對兔來(lái)源抗體的親和力較高，蛋白G對于小鼠等部分哺乳動(dòng)物抗體的親和力較高。

現在對于蛋白Ａ和蛋白Ｇ，您是否有了更深入的認識呢？其實(shí)我們還有多種抗體親和材料供選，適合于捕捉各種抗體片段的CaptoＬ，以及有更好耐堿性的MabSelect SuRe，以及高載量高性能的MabSelect PrismA。

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