細胞轉染是指將外源分子如DNA，RNA等導入真核細胞的技術(shù)。隨著(zhù)分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中，其應用越來(lái)越廣泛。那么，羅氏應用科學(xué)部都有哪些轉染試劑，其優(yōu)勢都有哪些？本期帶大家走進(jìn)羅氏轉染試劑的多彩世界。

 X-tremeGENE 9 DNA 轉染試劑   

簡(jiǎn)介：

X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2 μm濾膜過(guò)濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實(shí)驗。

優(yōu)勢：

1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數據。

2.操作簡(jiǎn)便、節省時(shí)間，只需對X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應混合物(有無(wú)血清均可)。

3.對于常用細胞無(wú)需進(jìn)行費時(shí)費力的優(yōu)化工作。

 X-tremeGENE HP DNA 轉染試劑   

簡(jiǎn)介：

X-tremeGENE HP DNA轉染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉染試劑，兼容含血清或不含血清的培養基，可用于轉染各類(lèi)真核細胞(包括昆蟲(chóng)細胞)以及多種難轉染細胞系。

優(yōu)勢：

1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑，無(wú)動(dòng)物源性成分，室溫穩定。

2.高轉染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的腫瘤細胞系有高轉染效率。

3.使用細胞毒性低的試劑，結果相關(guān)性好。

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉染性能。通過(guò)X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉染方法將GFP表達質(zhì)粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP，導致存活細胞量減少(圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò ))。

圖3. X-tremeGENE HP對難轉細胞系的轉染效果優(yōu)于脂質(zhì)體轉染方法。應用GFP編碼的質(zhì)粒對人/鼠間充質(zhì)干細胞進(jìn)行轉染。XHP 3:1表示用X-tremeGENE HP及相應的轉染試劑(μl): 質(zhì)粒DNA (μg)比例進(jìn)行轉染(圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò ))。

 X-tremeGENE siRNA 轉染試劑   

簡(jiǎn)介：

X-tremeGENE siRNA轉染試劑一種優(yōu)化的多組分低毒試劑，能夠向多種常用細胞系有效遞送小干擾RNA(siRNA)作用于序列特異的目標基因，引發(fā)基因表達下調或基因沉默。

優(yōu)勢：

1.在多種不同類(lèi)型細胞中基因敲除效率超過(guò)90%。

2.高靈活應用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉染的基因沉默實(shí)驗。

3.細胞毒性低，結果相關(guān)性好，確保所觀(guān)察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過(guò)程本身介導。

4.兼容含血清或不含血清的培養基，轉染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗。根據各試劑說(shuō)明書(shū)建議的操作流程，或標準實(shí)驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞。 通過(guò)LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent在四種細胞中轉染后基因沉默表現均表現優(yōu)異。

產(chǎn)品清單

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