經(jīng)常聽(tīng)到糖基化修飾，今天帶大家一探究竟。什么是糖基化修飾呢？糖基化是在糖基轉移酶的控制下，蛋白質(zhì)或脂質(zhì)附加上糖類(lèi)的過(guò)程，發(fā)生于內質(zhì)網(wǎng)和高爾基體。糖基化修飾是一類(lèi)非常重要的翻譯后修飾，大部分膜蛋白和分泌蛋白均為糖蛋白，糖基化修飾不僅影響蛋白質(zhì)的空間構象、活性、運輸和定位，同時(shí)在信號轉導、分子識別，免疫等過(guò)程中發(fā)揮重要作用。

通常將糖基化分為兩類(lèi)：N連接的糖基化 (糖通過(guò)一個(gè)N原子連接在A(yíng)sn)和O連接的糖基化 (糖通過(guò)O原子連接在Ser/Thr)。先看N-糖的生物合成，在糖苷酶的作用下，N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和甘露糖(Mannose)分子被連接在A(yíng)sn殘基上，形成N-糖的基本架構。半乳糖(Gal)、N-乙酰神經(jīng)氨酸(Neu5AC)、N-乙酰半乳糖胺(GalNAc) 等分子會(huì )參與糖鏈形成的完整過(guò)程。

再來(lái)看一下O連接的糖基化，O-糖在個(gè)體發(fā)育、腫瘤發(fā)生、細胞粘附等諸多生命活動(dòng)中均發(fā)揮重要作用，但是由于缺乏共有修飾序列信息和有效的分析手段，因此對O連接的糖基化修飾知之甚少。O連接的糖基化是由不同的糖基轉移酶催化的， 每次加上一個(gè)單糖，最后在糖鏈末端加上唾液酸殘基（圖中紫色方塊）。

如何得知到底哪個(gè)位點(diǎn)發(fā)生了O-連接的糖基化呢？是否有一種酶能夠切割糖基化位點(diǎn)所在的氨基酸，使得蛋白會(huì )被切成幾段，這樣以來(lái)通過(guò)質(zhì)譜分析或者其他方法就能分析出糖基化發(fā)生的位點(diǎn)呢？答案Yes. 這款酶就是瑞典Genovis公司的OpeRATOR，該酶在唾液酸去除酶SialEXO的幫助下，可以切割O-糖基化位點(diǎn)所在氨基酸的N端，真正做到了哪里有糖切哪里！酶切示意圖如下：

兩種酶的特征如下圖所示：

這樣的O-糖位點(diǎn)切割酶是否對您的實(shí)驗有幫助呢?我們還提供配套的試劑盒，試劑盒中提供O-糖蛋白親和柱，OpeRATOR和SialEXO，可柱上酶切并特異性回收O-糖肽段。

注：圖片等部分信息來(lái)源網(wǎng)絡(luò )

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