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使用ATCC基因編輯細胞,開(kāi)啟新藥篩選之旅
背景介紹
ALK基因調控細胞生長(cháng),能夠幫助神經(jīng)細胞增殖,在大腦的發(fā)育過(guò)程中起到重要作用。當ALK 基因與其他基因比如EML4發(fā)生融合,由此產(chǎn)生的EML4-ALK融合基因成為非小細胞肺癌(NSCLC)的主要致癌因子。
EML4-ALK融合基因于2007年在非小細胞肺癌(NSCLC)中首次報道。臨床研究發(fā)現,EML4-ALK融合出現在大約3-5%的非小細胞肺癌中,而EML4-ALK融合已被確定為重要的藥物靶標和診斷生物標志物。
近年來(lái),CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)正在給整個(gè)科研界帶來(lái)革命性變化。利用這個(gè)技術(shù),我們可以輕松對靶基因進(jìn)行定點(diǎn)突變、敲除,甚至基因插入。
ATCC利用CRISPR / Cas9技術(shù)成功構建了EML4-ALK融合基因A549細胞。首先通過(guò)Cas9對EML4和ALK基因中的適當位點(diǎn)進(jìn)行精確切割,通過(guò)細胞自身的同源DNA修復系統創(chuàng )造了包含EML4-ALK融合基因A549細胞,為癌癥篩查診斷和新藥篩選提供了強有力的細胞模型。
嚴格篩選
經(jīng)過(guò)基因編輯后的細胞克隆經(jīng)過(guò)嚴格的篩選
基因及轉錄鑒定包括:
Sanger 法測序
NGS
PCR 和 RT-PCR
蛋白表達和功能鑒定包括:
Western blot
藥物反應
其他功能鑒定
細胞形態(tài)分析
耐藥性分析
訂購信息
中原生物是ATCC公司授權中國獨家代理
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