GST（谷胱甘肽S-轉移酶）能特異的與其底物谷胱甘肽結合。根據此原理，融合有GST標簽的目的蛋白可以與帶谷胱甘肽配基的親和介質(zhì)特異結合，再用酶將GST標簽切除，即可得到單純的目的蛋白。GST融合蛋白純化具有很多優(yōu)勢，如純度高、純化條件溫和、蛋白活性不受影響、高可溶性等。

今天先介紹——GST標簽蛋白純化的方法，小伙伴們快來(lái)圍觀(guān)吧~

GST 標簽蛋白純化方案

GST融合蛋白可以通過(guò)親和層析方便地從細菌裂解物中被純化。使用Glutathione Sehparose介質(zhì)，標簽蛋白與配體結合，雜質(zhì)通過(guò)結合緩沖液被洗脫去除，之后標簽蛋白在溫和、非變性的條件下被洗脫，使得蛋白的抗原性能和功能得以保護。

常用的純化介質(zhì)及選擇：

批量處理/重力（無(wú)需設備）

預裝柱（搭配AKTA層析系統 ）    

其它配套                                  

小貼士
GST融合蛋白容易氧化形成二聚體，影響純化效果，所以經(jīng)常會(huì )在結合及洗脫緩沖液中添加1-10mM DTT。
GST融合標簽是酶與底物的親和作用，變性劑存在的時(shí)候，是無(wú)法結合到柱子上的。

GST 標簽蛋白純化填料——不同類(lèi)型產(chǎn)品滿(mǎn)足您的不同需要

GSTrap 4B & Glutathione Sepharose 4B

這款填料所選用的Sepharose 4B基架，是經(jīng)典的高載量基架，在許多其它填料結合效率不好的實(shí)驗中，它也能有很好的表現。

GSTrap FF & Glutathione Sepharose 4 FF

FF代表著(zhù)高流速并且適合后期的工藝放大。但是GST標簽蛋白與配基的結合是酶與底物的反應，速度較慢，過(guò)高的流速會(huì )影響結合效率。

GSTrap HP & Glutathione Sepharose HP

HP填料的平均粒徑更小，約為34μm，分辨率更高，使得結合在填料上的蛋白能夠被更集中地洗脫下來(lái)，所以濃度和純度更高。但反壓也相對較高，適合有ÄKTA設備或者蠕動(dòng)泵的客戶(hù)。

訂購信息

中原生物是GE公司授權的北方區總代理

如有相關(guān)問(wèn)題請撥打免費服務(wù)電話(huà)咨詢(xún)

400-8100-881

如您對我們的服務(wù)有任何的意見(jiàn)和建議請發(fā)至如下郵箱

service@sinozhongyuan.com