ELISA是一種免疫測定。免疫測定（immunoassay，IA）是應用免疫學(xué)技術(shù)測定標本的方法。在臨床檢驗中主要通過(guò)抗原抗體反應檢測體液中的抗體或抗原性物質(zhì)

1.1　抗原

抗原是能在機體中引起特異性免疫應答的物質(zhì)?？乖M(jìn)入機體后，可刺激機體產(chǎn)生抗體和引起細胞免疫。在免疫測定中，抗原是指能與抗體結合的物質(zhì)。能在機體中引起抗體產(chǎn)生的抗原多為分子量大于5000的蛋白質(zhì)。小分子化合物在與大分子蛋白質(zhì)結合后能引起機體產(chǎn)生特異性抗體的，稱(chēng)為半抗原（hapten）。例如某些激素、藥物等?？乖姆磻匀Q于抗原決定簇（antigenic determinant），或稱(chēng)為表位（epitope）。一個(gè)抗原分子可帶有不同的決定簇。

1.2　抗體

1.2.1　抗體的結構

抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類(lèi)，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個(gè)輕鏈（L）和兩個(gè)重鏈（H）的單體組成。Ig的輕鏈是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda）兩種型別。五類(lèi)Ig的重鏈結構不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱(chēng)為γ（gamma）鏈和μ（mu）鏈。IgG的結構見(jiàn)圖。

① 木瓜酶裂解部位    ② 胃蛋白酶裂解部位

重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異，稱(chēng)為可變區，分別用VH和VL表示。兩者構成抗體的抗原結合部位，只與相應的抗原決定簇匹配，發(fā)生
特異性結合（見(jiàn)圖），是抗體專(zhuān)一性結合抗原的結構基礎。

IgG可被木瓜蛋白酶分解為三個(gè)區段，其中兩個(gè)相同的區段稱(chēng)抗原結合片段（Fab）。每個(gè)Fab都保存結合抗原的能力，但只有一個(gè)抗原結合位點(diǎn)，是單價(jià)的，與抗原結合后不出現凝集或沉淀。另一區段稱(chēng)Fc段，無(wú)抗體活性，但具有IgG特有
的抗原性。

IgG可被胃蛋白酶分解為兩個(gè)片段，一個(gè)Fab雙體，稱(chēng)F（ab'）2，能和兩個(gè)相同的抗原結合；另一片段類(lèi)似Fc，隨后被分解成小分子多肽，無(wú)生物活性。

IgM是由五個(gè)單體組成的五聚體，含10個(gè)重鏈和10個(gè)輕鏈，具有10個(gè)抗原結合價(jià)，由于空間位置的影響，只表現為五個(gè)抗原結合價(jià)。IgM分子量約為900000，IgG分子量約為150000。

機體被微生物感染后，先產(chǎn)生IgM抗體，然后產(chǎn)生IgG抗體。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間，IgM抗體量逐漸減少而消失，而IgG抗體可長(cháng)期存在，在疾病痊愈后可持續數年之久。

IgM抗體一般為保護性抗體，具有免疫性。因此IgM抗體的測定，對某些傳染病如甲型肝炎有較高的臨床診斷價(jià)值。

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